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細(xì)胞在MVE液氮罐保存方法及步驟

點(diǎn)擊次數(shù):2060 更新時(shí)間:2019-06-13

MVE液氮罐也被眾多領(lǐng)域所應(yīng)用,不管是生活中還是生產(chǎn)中都能看到它的身影,如醫(yī)療行業(yè),生物醫(yī)學(xué)行業(yè),金屬生產(chǎn)行業(yè)以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細(xì)胞在液氮罐保存方法及步驟

一、MVE液氮罐的應(yīng)用范圍及用途

1.在生物醫(yī)學(xué)行業(yè)中的應(yīng)用:目前主要是用于牛、羊等優(yōu)良種公畜以及珍惜動(dòng)物的精液保存,以及遠(yuǎn)距離的運(yùn)輸和醫(yī)學(xué)中的疫苗、菌毒種、細(xì)胞以及人、動(dòng)物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲(chǔ)存的液氮中,長(zhǎng)期活性保存。

2.在金屬生產(chǎn)行業(yè)中的應(yīng)用:利用成都金鳳液氮罐中儲(chǔ)存的液氮對(duì)金屬材料進(jìn)行深冷處理,可以改變金屬材料的金相組織,顯著提高金屬材料的硬度、強(qiáng)度和耐磨性能。

精密儀器電子行業(yè)中的應(yīng)用:將精密零件經(jīng)過(guò)液氮深冷處理后進(jìn)行裝配,提高零件裝配質(zhì)量,從而提高設(shè)備或儀器的整機(jī)性能。

3.醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的應(yīng)用:用液氮容器內(nèi)儲(chǔ)存的液氮作為制冷劑進(jìn)行手術(shù),治療或冷藏冷凍細(xì)胞、組織等。冷療儀用于醫(yī)院臨床各科室能夠代替手術(shù),安全無(wú)毒,無(wú)害痛苦少,不損害健康組織,殺菌效果良好。

4.美容領(lǐng)域的應(yīng)用:主要用液氮的超低溫來(lái)處理皮膚表層。如采用手術(shù)治療,疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷,而冷凍治療卻不會(huì)出現(xiàn)這些情況,而且效果也比較理想。

二、細(xì)胞在液氮罐保存步驟:

怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來(lái)講,凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作:

1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;

2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期。

5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐;或者可以在4℃,2h;

三、細(xì)胞在MVE液氮罐的儲(chǔ)存分為兩種:

液氮罐里一般灌有低溫液氮,細(xì)胞的儲(chǔ)存需要低溫環(huán)境,放入-196度的液氮里對(duì)細(xì)胞是長(zhǎng)期保存的一個(gè)適合的環(huán)境。常規(guī)液氮罐是將細(xì)胞存入液氮罐的液相里儲(chǔ)存,有的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,*浸入。使細(xì)胞*處于液氮-196度環(huán)境下,才能夠長(zhǎng)期保存細(xì)胞。

 

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